体外药效学研究
用分子、细胞、离体组织器官等水平上的研究，阐明药物发挥药效的本质，初步了解药物的作用，可以根据产品靶点通路定制化设计体外药效学研究方案。
细胞活力与增殖/毒性试验
评估药物对细胞活力的影响，检测细胞增殖能力和细胞毒性，为药物安全性评价提供重要依据。
- MTT法：通过检测线粒体脱氢酶活性评估细胞活力
- CCK-8法：基于水溶性四唑盐的细胞增殖和毒性检测方法
- 细胞增殖曲线绘制
- IC50值计算
- 细胞形态学观察
细胞凋亡试验
检测药物诱导的细胞凋亡，评估药物对细胞死亡途径的影响，为抗肿瘤药物等开发提供关键数据。
- Annexin V/PI双染流式细胞术：区分早期凋亡、晚期凋亡和坏死细胞
- TUNEL法：检测DNA断裂，标记凋亡细胞
- 凋亡率定量分析
- 凋亡相关蛋白表达检测（Caspase-3、PARP等）
- 凋亡形态学观察（荧光显微镜、电子显微镜）
细胞周期分析
分析药物对细胞周期进程的影响，检测细胞周期阻滞，评估药物对细胞增殖的调控机制。
- PI染色流式细胞术：检测DNA含量，分析细胞周期分布
- G0/G1期、S期、G2/M期细胞比例分析
- 细胞周期相关蛋白表达检测（Cyclin、CDK、p21、p27等）
- 细胞周期阻滞机制研究
细胞迁移与侵袭试验
评估药物对细胞迁移和侵袭能力的影响，为抗肿瘤转移药物开发提供重要评价指标。
- 划痕试验（Wound Healing Assay）：检测细胞迁移能力
- Transwell/Boyden小室试验：评估细胞迁移和侵袭能力
- 迁移距离和时间曲线分析
- 侵袭细胞计数和统计分析
- 迁移相关蛋白表达检测（MMP、E-cadherin、N-cadherin等）
分子通路与靶点验证
验证药物作用靶点，分析信号通路激活或抑制，阐明药物作用机制。
- 蛋白质印迹法（Western Blot）：检测目标蛋白表达水平
- 酶联免疫吸附试验（ELISA）：定量检测细胞因子、生长因子等
- 电化学发光法（ECLIA）：高灵敏度检测蛋白表达
- PCR（RT-PCR、qPCR）：检测基因表达水平
- 信号通路关键蛋白磷酸化检测
- 转录因子活性检测